МЕТОДИКА ВЗЯТИЯ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ МИКРОСКОПИЧЕСКОГО МЕТОДА ИССЛЕДОВАНИЯ В АКУШЕРСКО-ГИНЕКОЛОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

Полный текст

Определение. Микроскопический метод исследования - это способ изучения различных объектов с помощью микроскопа. В биологии и медицине эти методы позволяют изучать строение микроскопических объектов, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности глаза человека. Основу данного метода составляет световая и электронная микроскопия. В клинической и научной деятельности также используется фазово-контрастная, интерференционная, люминесцентная, поляризационная, стереоскопическая, ультрафиолетовая и инфракрасная микроскопия. В основе этих методов лежат различные свойства света. При электронной микроскопии изображение объектов исследования возникает за счет направленного потока электронов. Для световой микроскопии и основанных на ней других микроскопических методов исследования определяющее значение, помимо разрешающей способности микроскопа, имеют характер и направленность светового луча, а также особенности изучаемого объекта, который может быть прозрачным и непрозрачным. В зависимости от свойств объекта изменяются физические свойства света - его цвет и яркость, связанные с длиной и амплитудой волны, фаза, плоскость и направление распространения волны. На использовании этих свойств света и строятся различные микросопические методы диагностики. Для световой микроскопии биологические объекты обычно окрашивают с целью выявления тех или иных их свойств. При этом ткани должны быть фиксированы, так как окраска выявляет определенные структуры только убитых клеток. В живой клетке краситель обособляется в цитоплазме в виде вакуоли и не прокрашивает ее структуры. Однако в световом микроскопе можно изучать и живые биологические объекты с помощью метода витальной микроскопии. В этом случае применяют темнопольный конденсор, который встраивают в микроскоп. В акушерско-гинекологической практике наиболее часто используются следующие разновидности световой микроскопии. Метод светлого поля в проходящем свете используют для микроскопии прозрачных и неоднородных по структуре объектов. Освещение направлено на исследуемый объект снизу, световые лучи проходят сквозь прозрачную среду и поглощаются в местах большей плотности. Чтобы изображение было более контрастным, материал для исследования предварительно окрашивают. Метод косого освещения используют для исследования прозрачных объектов. Сам метод подразумевает исследование объекта в свете, падающем под большим углом. При этом можно выявить особенности поверхности объекта (рельефность, контуры). Метод темного поля - освещение направлено на исследуемый прозрачный объект таким образом, что проходящие через него лучи собираются вместе и не попадают в объектив, благодаря чему получается светлое изображение на темном фоне. Метод висячей капли - с помощью данного метода можно исследовать подвижность живых микроорганизмов. Небольшую каплю биологического материала, содержащую микробную взвесь, наносят на середину покровного стекла. Предметное стекло с углублением (лункой), края которого смазаны вазелином, осторожно накладывают на покровное стекло так, чтобы капля исследуемой жидкости оказалась в центре углубления, плотно прижимают к стеклу и быстро переворачивают вверх. Для исследования препарата используют иммерсионный объектив, который погружают в иммерсионное масло на покровном стекле. Показания: скрининговая оценка степени «чистоты» влагалища при беременности и при плановых гинекологических осмотрах; лабораторное подтвержение вульвовагинальной инфекции; планируемые манипуляции на матке, шейке матки, влагалище. Цель: определение доминирующих морфотипов влагалищной микрофлоры; выявление маркеров бактериального вагиноза («ключевых» клеток), трихомониаза, гонореи; подсчет количества лейкоцитов, эпителиальных клеток. Информативность метода. В повседневной клинической практике микроскопическое исследование, как правило, используют для ускоренной ориентировочной диагностики. Основные задачи микроскопии: выявление возбудителя в клиническом материале, ориентировочная идентификация на основе определения характерных морфологических и тинкториальных признаков микроорганизмов, а также изучение окрашенных мазков из колоний чистых культур. При некоторых инфекционных болезнях, для возбудителей которых характерна специфичность морфологии (протозойные болезни, гельминтозы, грибковые заболевания, спирохетозы), микроскопическое исследование - основной или один из основных методов диагностики. Наибольшую диагностическую ценность микроскопического метода исследования в акушерско-гинекологической практике представляет выявление лейкоцитарной реакции (подстчет количества лейкоцитов), что невозможно произвести никаким другим методом диагностики, кроме микроскопии. Подготовка к исследованию. Оптимальным временем забора является первая фаза менструального цикла. При наличии менструальных выделений исследование может оказаться неинформативным. При беременности взятие биологического материала для микроскопии производится в соответствии с действующими инструкциями Минздрава РФ, регламентирующими дородовое наблюдение беременных. До взятия образцов биологического материала необходимо подписать предметное стекло, разделить его на три равные части, указав в каждой локус: V, C, U (влагалище, цервикальный канал и уретра); для этой цели используйте специальный тонкий маркер для письма по стеклу. Техника проведения. Шейка матки обнажается в зеркалах (рис. 1). Производится удаление слизи и влагалищных выделений с шейки матки стерильным марлевым тампоном (рис. 2); производят визуальную оценку влагалищной порции шейки матки. Хлопковым тампоном (рис. 3), мягкой щеточкой - урогенитальным универсальным зондом (рис. 4) или ложкой Фолькмана (рис. 5) производится взятие свободного отделяемого влагалища из заднего, латерального и переднего сводов (рис. 6) с последующим нанесением его на предметное стекло. Образец биологического материала необходимо нанести на сухое обезжиренное стекло ровным слоем, создав окружность диаметром около 1-1,5 см. Для получения отделяемого из цервикального канала, как указывалось выше, стерильным марлевым тампоном удаляют выделения и слизь с шейки матки (см. рис. 2), мягкую щетку или марлевый тампон вводят в цервикальный канал на глубину до 1-2 см (рис. 7). Материал затем наносится на предметное стекло аналогичным способом (рис. 8). Свободное отделяемое из уретры забирается аналогично вышеописанной методике с той разницей, что перед взятием рекомендуется произвести массаж уретры - производят 2-3 массирующих движения к наружному отверстию уретры по уретральному килю влагалища (рис. 9-11). Перед массажем уретры необходимо протереть наружное отверстие уретры стерильным марлевым тампоном. Зонд или тампон вводят на глубину 1,5-2 см и легким поскабливанием передней и боковых стенок уретры получают отделяемое (рис. 12). Материал фиксируют на воздухе в течение 5-10 мин. Взятие материала у девочек производится со слизистой оболочки преддверия влагалища, иногда из заднего свода влагалища путем введения зонда через гименальные кольца. Маркировка материала. На предметном стекле указывают фамилию пациентки, дату взятия отделяемого, локусы: V, C, U (влагалище, цервикальный канал и уретра). После фиксации материала на воздухе в течение 3-5 мин предметное стекло убирают в пенал либо герметично завертывают в бумагу (рис. 13). Последним этапом является заполнение бланка-направления, в котором необходимо заполнить все имеющие графы.

Об авторах

Виталий Александрович Каптильный

ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский университет)

Email: 1mgmu@mail.ru
канд. мед. наук, вед. науч. сотр. научно-исследовательского отдела женского здоровья НИЦ, ассистент каф. акушерства и гинекологии № 1 лечебного факультета ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России 119991, Россия, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

Список литературы

Дополнительные файлы