Синтез стероидных трейсеров методом оксимного лигирования и их использование в поляризационном флуоресцентном иммуноанализе

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Предложен метод синтеза конъюгатов ряда кетостероидов с 6-карбоксифлуоресцеином с использованием короткого бифункционального реагента аминооксипропиламина. Стереоизомеры, образующиеся при получении оксимов стероидов, были разделены с помощью препаративной ТСХ и протестированы в поляризационном флуоресцентном иммуноанализе (FPIA) с применением моноклональных антител. Изучены кинетические параметры связывания полученных флуоресцентных производных с моноклональными антителами к прогестерону. Таким образом, разработан эффективный и универсальный подход к синтезу флуоресцентных конъюгатов для иммуноанализа с оптимальной длиной линкера, который улучшает их аналитические характеристики и упрощает их получение. Продемонстрирована перспективность полученных соединений для практического применения в клинической диагностике и при анализе объектов окружающей среды.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

И. А. Прохоренко

ФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН

Автор, ответственный за переписку.
Email: prig67@mail.ru
Россия, 117997 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Д. А. Глущенко

ФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН

Email: prig67@mail.ru
Россия, 117997 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Е. Л. Гуляк

ФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН

Email: prig67@mail.ru
Россия, 117997 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

И. В. Михура

ФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН

Email: prig67@mail.ru
Россия, 117997 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

В. А. Коршун

ФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН

Email: prig67@mail.ru
Россия, 117997 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Л. И. Мухаметова

МГУ им. М.В. Ломоносова

Email: prig67@mail.ru

химический факультет

Россия, 119991 Москва, Ленинские горы, 1, стр. 3

С. А. Еремин

МГУ им. М.В. Ломоносова

Email: prig67@mail.ru

химический факультет

Россия, 119991 Москва, Ленинские горы, 1, стр. 3

Список литературы

  1. Zamri M.F.M.A., Bahru R., Pramanik S.K., Fattah I.M.R. // J. Water Proc. Engin. 2021. V. 41. 102017. https://doi.org/10.1016/j.jwpe.2021.102017
  2. Miller W.L., Auchus R.J. // Endocr. Rev. 2011. V. 32. P. 81. https://doi.org/10.1210/ER.2010-0013
  3. Куджаев А.М., Андрианова А.Г., Гущина А.Е., Смирнов И.В., Ротанова Т.В. // Биоорг. химия. Т. 48. С. 381–414. [Kudzhaev A.M., Andrianova A.G., Gustchina A.E., Smirnov I.V., Rotanova T.V. // Russ. J. Bioorg. Chem. 2022. V. 48. P. 678–709.] https://doi.org/10.1134/S1068162022040136
  4. Gore A.C. // JAMA Int. Med. 2016. V. 176. P. 1705–1706. https://doi.org/10.1001/jamainternmed.2016.5766
  5. Abraham G.E. // J. Steroid Biochem. 1975. V. 6. P. 261–270. https://doi.org/10.1016/0022-4731(75)90141-7
  6. Relave F., Lefebvre R.C., Beaudoin S., Price C. // Can. Vet. J. 2007. V. 48. P. 823–826.
  7. Stanczyk F.Z., Lee J.S., Santen R.J. // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2007. V. 16. P. 1713–1719. https://doi.org/10.1158/1055-9965.EPI-06-0765
  8. Tate J., Ward G. // Clin. Biochem. Rev. 2004. V. 25. P. 105–120.
  9. Hall M.D., Yasgar A., Peryea T., Braisted J.C., Jadhav A., Simeonov A., Coussens N.P. // Methods Appl. Fluoresc. 2016. V. 4. P. 022001. https://doi.org/10.1088/2050-6120/4/2/022001
  10. Smith D.S., Eremin S.A. // Anal. Bioanal. Chem. 2008. V. 391. P. 1499–1507. https://doi.org/10.1007/s00216-008-1897-z
  11. Choi M.J., Choi J., Yoon D.Y., Park J., Eremin S.A. // Biol. Pharm. Bull. 1997. V. 20. P. 309–314. https://doi.org/10.1248/bpb.20.309
  12. Колосова A.Ю., Еремин С.А., Гаврилова Е.М., Егоров А.М. // Проблемы эндокринологии. 1994. Т. 40. С. 48–51. https://doi.org/10.14341/probl12147
  13. Hong J.Y., Choi M.J. // Biol. Pharm. Bull. 2002. V. 25. P. 1258–1262. https://doi.org/10.1248/bpb.25.1258
  14. Quémener D., Davis T.P., Barner-Kowollik C., Stenzel M.H. // Chem. Commun. 2006. V. 48. P. 5051–5053. https://doi.org/10.1039/B611224B
  15. Clède S., Lambert F., Sandt C., Kascakova S., Unger M., Harté E., Plamont M.-A., Saint-Forth R., Deniset- Besseau A., Guerouiab Z., Hirschmugl C., Lecomte S., Dazzi A., Vessières A., Policar C. // Analyst. 2013. V. 138. P. 5627–5638. https://doi.org/10.1039/C3AN00807J
  16. Robinson S.W., Beer P.D. // Org. Biomol. Chem. 2017. V. 15. P. 153–159. https://doi.org/10.1039/ c6ob02339h
  17. Khomutov A.R., Vepsalainen J.J., Shvetsov A.S., Hyvönen T., Keinänen T.A., Pustobaev V.N., Eloranta T.O., Khomutov R.M. // Tetrahedron. 1996. V. 52. P. 13751–13766. https://doi.org/10.1016/0040-4020(96)00836-8
  18. Sapozhnikova A., Misyurin V.A., Ryazantsev D.Y., Kokin E.A., Finashutina Yu.P., Alexeeva A.V., Ivanov I.A., Kocharovskaya M.V., Tikhonova N.A., Popova G.P., Alferova V.A., Ustinov A.V., Korshun V.A., Brylev V.A. // Int. J. Mol. Sci. 2022. V. 22. P. 12845. https://doi.org/10.3390/ijms222312845
  19. Kolmer D.K., Cool E.T. // Chem. Rev. 2017. V. 117. P. 10358–10376. https://doi.org/10.1021/acs.chemrev.7b00090
  20. Adamczyk M., Chen Y.-Y., Grote J., Mattingly P.G. // Steroids. 1999. V. 64. P. 283–290. https://doi.org/10.1016/S0039-128X(99)00004-5
  21. Мухаметова Л.И., Крылов В.Б., Соловьев A.C., Яшунский Д.В., Матвеев A.Л., Тикунова Н.В., Еремин С.А., Нифантьев Н.Э. // Известия Акад. наук. Сер. хим. 2021. №. 5. С. 975–981.
  22. Zhao Q., Bai Y., Wang H. // Talanta. 2020. V. 217. P. 121018. https://doi.org/10.1016/j.talanta.2020.121018

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Структура описанных ранее трейсеров для FPIA на основе стероидных гормонов: (а) – Pg3CMO-EDF (амид карбоксиметилоксима прогестерона с этилендиаминфлуоресцеинтиокарбаматом); (б) – 11-α-гидроксипрогестерон, ацилированный янтарным ангидридом.

Скачать (137KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Стереоизомерные фрагменты оксимов (VII) и (VIII).

Скачать (58KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Изменение сигнала поляризации флуоресценции свободных трейсеров Е(VII), Z(VII) и Pg3CMO-EDF (2.5 нМ) при образовании комплексов со специфическими антителами к прогестерону MAb-Pg (20 нМ) в сравнении с неспецифическими MAb-3G11 (30 нМ).

Скачать (197KB)
Метаданные
5. Рис. 4. Зависимость изменения сигнала поляризации флуоресценции от концентрации антител для трейсеров Е(VII) (кривая 1), Z(VII) (кривая 2) и Pg3CMO-EDF (кривая 3) (концентрации трейсеров 2.5 нМ); рН 8.5, 25°С.

Скачать (198KB)
Метаданные
6. Рис. 5. Градуировочные зависимости (а) и нормированные градуировочные зависимости (б) для трейсеров Е(VII) (кривая 1), Z(VII) (кривая 2) и Pg3CMO-EDF (кривая 3) (концентрации трейсеров 2.5 нМ); рН 8.5, 25°С.

Скачать (332KB)
Метаданные
7. Схема 1. Синтез бифункционального линкерного реагента (V).

Скачать (111KB)
Метаданные
8. Схема 2. Синтез этоксиэтилидензащищенного аминооксипроизводного (VI) 6-карбоксифлуоресцеина (6-FAM) и флуоресцентных трейсеров (VII) и (VIII).

Скачать (205KB)
Метаданные

© Российская академия наук, 2024