ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КЛЕТОЧНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ В ХИРУГИЧЕСКОМ ЛЕЧЕНИИ ТАЗОВОГО ПРОЛАПСА

Полный текст

Генитальный пролапс является одной из наиболее актуальных проблем современной медицины. Нередко заболевание проявляется в репродуктивном возрасте и носит прогрессирующий характер. Частота пролапса гениталий согласно данным мировой статистики варьирует в широких пределах от 2-3% в развитых странах до 85% женского населения в странах Востока. По данным Краснопольского В.И., Адамян Л.В., Кулакова В.И. опущение и выпадение внутренних половых органов наблюдается у 15-30% женщин, а у женщин старше 50 лет частота пролапса возрастает до 40%. В настоящее время наиболее эффективным методом лечения пролапса гениталий является хирургическое вмешательство. Пластика промежности с использованием собственных тканей сопровождается высокой частотой рецидивов (от 30%), что объясняется многими авторами изначальной потерей прочности соединительно-мышечного каркаса, а подобные операции восстанавливают его только на 50%. В связи с этим большое распространение получили операции с использованием нерассасывающихся синтетических материалов. Использование сетчатых протезов при пластике промежности сопровождается более низким процентом рецидивов (5-40%). Поэтому возрос интерес к усовершенствованию имплантационных материалов путем создания новой клеточно-инженерной конструкции для восстановления фасциальных дефектов тазового дна. Материал и методы. В качестве матриксов использовалась сетка PROLENE MESH PMM3 (ETHICON), состоящая из нерассасывающихся волокон, изготовленных из изотактического кристаллического стереоизомера полипропилена, синтетического линейного полиолефина (С3Н6)п толщиной около 0,5 мм. В качестве клеточного материала использовали мезенхимальные стволовые клетки (МСК), полученные из костного мозга (КМ) у 6 лабораторных животных (крыс), адгезированные на пластике клетки веретеновидной формы, выстраивающиеся в направленные колонии. Мезенхимальные стволовые клетки костного мозга каждой лабораторной крысы третьего пассажа были нанесены на образцы сеток PROLENE MESH PMM3 (ETHICON). Из сетки в стерильных условиях вырезаны 12 фрагментов квадратной формы 10 х 10 мм. На каждый фрагмент сетки добавили по 250 мкл клеточной суспезии (400 тыс. клеток). Инкубировали при температуре 37°С во влажной среде, содержащей 5% СО2 в течение 60 мин. Затем в каждую лунку добавляли по 2 мл культуральной среды, продолжая инкубацию в тех же условиях. На 14-е сутки отмечалось закрытие ячеек сетки и образование монослоя из МСК КМ. Далее полученная клеточно-инженерная конструкция использовалась для имплантации лабораторным животным. Операция по имплантации хирургических сеток и клеточно-инженерных конструкций, полученных путем адгезии аутологичных мезенхимальных стволовых клеток на полипропиленовой сетке, проведена группе из 6 лабораторных животных. Контрольные сетки и тканеинженерная конструкция установлены в образованные «карманы» подапоневротического пространства на брюшной стенке у каждой из 6 крыс. Заживление послеоперационного шва наступало в среднем в течение 10-15 сут. Животные выводились из эксперимента через 2 мес (2 крысы) и 4,5 мес (4 крысы), образцы сеток отправлялись на гистологическое исследование. Образцы сеток вырезали, парафиновые срезы толщиной 5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону, изучали под микроскопом Olympus BX51, фотографировали с помощью видеокамеры фирмы «Спецтехника» (Москва) и программы Launch CAM VIEW. Proceedings of the Fourth V.F. Snegirev Readings “Women’s health and factors determining it” Результаты и выводы 1. На 3-и сутки отмечалась адгезия МСК на нитях сетки (преимущественно по углам), а через 14 сут - рост колоний (часть ячеек закрывались клетками). Мелкие ячейки практически полностью были закрыты клетками. 2. Через 1,5 мес произведен забор и морфологическое исследование тканей, окружавших имплантированные сетки у двух животных, у одного из которых была смоделирована запланированная экструзия. Тканеинженерная конструкция оказалась более надежной: пропиленовая сетка в отличие от опытного образца была проращена соединительной тканью, макрофаги и гигантские клетки немногочисленны, что свидетельствует о менее выраженной воспалительной реакции. 3. У остальных 4 лабораторных животных забор материала производился через 4,5 мес после установки имплантов. При вскрытии у одного животного имплантированный опытный материал не был обнаружен (вероятно, удален самим животным); у другого операция осложнилась экструзией сетки контрольного образца и выраженным воспалительным процессом. 4. При наличии экструзии сетки и расхождения швов имелась не только лимфо-макрофагальная, но и нейтрофильная инфильтрация соединительной ткани, что связано с инфицированием. В одном из случаев в контрольной группе инфицирование отсутствовало, и воспалительная инфильтрация образующейся соединительной ткани была минимальной. Однако соединительная ткань отличалась большей выраженностью отека и меньшей зрелостью по сравнению с аналогичной группой через 2 мес. 5. В двух случаях, когда хирургических осложнений не было, соединительная ткань вокруг сетки отличалась зрелостью и минимальной воспалительной реакцией (в отличие от контрольной сетки у того же животного). 6. Таким образом, полученные предварительные данные дают основания считать необходимым дальнейшее продолжение данной работы на большем количестве лабораторных животных для получения статистически достоверных результатов.

Об авторах

Я. Ю Сулина

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова»

Кафедра акушерства и гинекологии № 1 лечебного факультета г. Москва

А. И Ищенко

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова»

Кафедра акушерства и гинекологии № 1 лечебного факультета г. Москва

А. В Люндуп

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова»

Кафедра акушерства и гинекологии № 1 лечебного факультета г. Москва

Л. С Александров

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова»

Кафедра акушерства и гинекологии № 1 лечебного факультета г. Москва

А. А Ищенко

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова»

Кафедра акушерства и гинекологии № 1 лечебного факультета г. Москва

А. И Муравлёв

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова»

Кафедра акушерства и гинекологии № 1 лечебного факультета г. Москва

Список литературы

Дополнительные файлы