Обоснование. У пациенток с повторными неудачами имплантации основной акцент делается на нарушение рецептивности эндометрия, однако клеточные и рецепторные особенности эндометриальных мезенхимальных стромальных клеток в этой группе остаются практически не изученными, особенно на уровне пролиферативной активности и экспрессии эстрогеновых рецепторов. Настоящее исследование призвано охарактеризовать пролиферативную активность и экспрессию эстрогеновых рецепторов в мезенхимальных стромальных клетках эндометрия у пациенток данной группы для выявления нового звена патогенеза бесплодия и потенциальных терапевтических мишеней.

Цель исследования. Изучить функциональные свойства мезенхимальных стромальных клеток эндометрия, в частности их пролиферативную активность и экспрессию эстрогеновых рецепторов, у пациенток с повторными неудачами имплантации эуплоидных эмбрионов.

Методы. В пилотное исследование включены 5 пациенток в возрасте 25–40 лет. Основную группу составили 4 пациентки с повторными неудачами имплантации. В качестве положительного контроля использован образец эндометрия суррогатной матери с шестью своевременными родами в анамнезе. Мезенхимальные стромальные клетки выделяли из биоптатов эндометрия, полученных путём аспирационной биопсии в первой фазе менструального цикла. Экспрессию гена ESR1 определяли методом ПЦР в реальном времени, белок эстрогенового рецептора α (ERα) — иммуноцитохимически с флуоресцентными антителами. Пролиферативную активность мезенхимальных стромальных клеток оценивали в системе анализа живых клеток IncuCyte в контрольной среде и при добавлении 17β-эстрадиола 0,1 нM.

Результаты. Содержание мРНК эстрогенового рецептора ESR1 в культивируемых мезенхимальных стромальных клетках эндометрия оказалось приблизительно в 10 раз выше по сравнению с мезенхимальными стромальными клетками жировой ткани. Иммуноцитохимическое исследование выявило специфическую экспрессию ядерных ERα во всех образцах, при этом у пациенток с бесплодием неясного генеза количество рецепторов было снижено относительно контроля, а наименьший уровень экспрессии ERα обнаружен при трубно-перитонеальном бесплодии. Мезенхимальные стромальные клетки эндометрия пациенток с повторными неудачами имплантации продемонстрировали достоверно более низкую скорость пролиферации по сравнению с мезенхимальными стромальными клетками суррогатной матери. Наименьшая пролиферативная способность мезенхимальных стромальных клеток эндометрия обнаружена у пациенток с бесплодием неясного генеза. Добавление 17β-эстрадиола вызвало статистически значимое увеличение скорости пролиферации мезенхимальных стромальных клеток эндометрия как у суррогатной матери, так и у пациенток с бесплодием неясного генеза. У пациенток с трубно-перитонеальным бесплодием эстрадиол в концентрации 0,1 нМ не стимулировал пролиферацию мезенхимальных стромальных клеток эндометрия.

Заключение. Впервые продемонстрировано снижение пролиферативной активности и экспрессии эстрогеновых рецепторов (ERα) в мезенхимальных стромальных клетках эндометрия у пациенток с повторными неудачами имплантации. Полученные данные свидетельствуют о том, что мезенхимальные стромальные клетки пациенток с бесплодием неясного генеза сохраняют чувствительность к эстрогену, несмотря на снижение количества рецепторов. Результаты исследования расширяют фундаментальные представления о функциональных особенностях эндометриальных мезенхимальных стромальных клеток при повторных неудачах имплантации.

论证。 在反复种植失败的患者中，主要关注点在于子宫内膜容受性的受损，然而该群体中子宫内膜间充质基质细胞的细胞和受体特征，特别是在增殖活性和雌激素受体表达水平上，仍基本未被研究。本研究旨在表征该组患者子宫内膜间充质基质细胞的增殖活性和雌激素受体表达，以揭示不孕症发病机制的新环节和潜在的治疗靶点。

目的。 研究反复整倍体胚胎种植失败患者子宫内膜间充质基质细胞的功能特性，特别是其增殖活性和雌激素受体表达。

方法。 初步研究纳入了5名25–40岁的女性患者。主要组由4名反复种植失败的患者组成。阳性对照采用一名有6次足月产史的代孕母亲的子宫内膜样本。间充质基质细胞分离自月经周期第一阶段通过抽吸活检获取的子宫内膜活检组织。ESR1基因表达采用实时定量PCR法检测，雌激素受体α (ERα) 蛋白采用荧光抗体免疫细胞化学法检测。在对照培养基及添加0.1 nM 17β-雌二醇的条件下，利用IncuCyte活细胞分析系统评估间充质基质细胞的增殖活性。

结果。 培养的子宫内膜间充质基质细胞中雌激素受体 ESR1 mRNA 的含量约为脂肪组织间充质基质细胞的 10 倍。免疫细胞化学研究显示，所有样本中均存在核 ERα 的特异性表达，其中不明原因不孕症患者的受体数量较对照组有所减少，而在输卵管腹膜性不孕症患者中发现 ERα 的表达水平最低。反复着床失败患者的子宫内膜间充质基质细胞增殖速率显著低于代孕母亲的间充质基质细胞。在不明原因不孕症患者中发现子宫内膜间充质基质细胞的增殖能力最低。添加 17β-雌二醇使代孕母亲和不明原因不孕症患者的子宫内膜间充质基质细胞增殖速率均出现统计学显著增加。在输卵管腹膜性不孕症患者中，浓度为 0.1 nM 的雌二醇未能刺激子宫内膜间充质基质细胞的增殖。

结论。 首次证实了反复种植失败患者子宫内膜间充质基质细胞中增殖活性和雌激素受体 (ERα) 表达的降低。所得数据表明，尽管受体数量减少，不明原因不孕症患者的间充质基质细胞仍保持对雌激素的敏感性。研究结果扩展了关于反复着床失败中子宫内膜间充质基质细胞功能特征的基础认识。